एंटरोबैक्टीरिया और कुछ वाइब्रियोस के विभेदक निर्धारण में, वोग्स-प्रोस्काउर प्रतिक्रिया एक विशेष स्थान रखती है। यह परीक्षण बैक्टीरिया द्वारा ग्लूकोज को किण्वित करके एसीटोन बनाने की क्षमता पर आधारित है।
अनुसंधान प्रक्रिया का सार
सूक्ष्म जीव विज्ञान में, Voges-Proskauer प्रतिक्रिया का उपयोग अक्सर एंटरोबैक्टीरिया के यर्सिनिया परिवार (स्यूडोट्यूबरकुलोसिस और एंटरोकोलाइटिस के रोगजनकों सहित), एस्चेरिचिया कोलाई और बीजाणु बनाने वाले एरोबेस के भीतर अंतर करने के लिए किया जाता है। कुछ अभिकर्मकों को जोड़ने पर माध्यम को रंगकर परिणाम की कल्पना की जाती है।
यह परीक्षण IMViC श्रृंखला से संबंधित है (इंडोल, मिथाइल रेड, वोग्स-प्रोस्काउर आई साइट्रेट का संक्षिप्त नाम) - विभेदक परिभाषाओं सहित पहचान परीक्षणों का एक समूह:
- इंडोल के साथ, ट्रिप्टोफैन के इंडोल में टूटने के आधार पर, कोवाक्स या एर्लिच अभिकर्मक की उपस्थिति में उपयोग किया जाता है;
- उपयोगमिथाइलरोथ, या मिथाइल रेड, जो ग्लूकोज चयापचय के परिणामस्वरूप दिए गए पीएच का पता लगाता है;
- एसिटाइल-मिथाइलकारबिनोल का पता लगाने के लिए वोग्स-प्रोस्कर प्रतिक्रियाएं;
- माध्यम के क्षारीकरण के परिणामस्वरूप रंग परिवर्तन के साथ साइट्रेट का उपयोग।
प्रक्रिया का सार ऑक्सीजन की उपस्थिति में कास्टिक पोटाश के साथ उनके द्वारा बनाए गए एसीटोन की बातचीत के कारण निदान बैक्टीरिया की उपस्थिति का दृश्य है। एसिटाइल-मिथाइलकारबिनोल को डायसेटाइल में ऑक्सीकृत किया जाता है, जो एक चमकदार लाल या गुलाबी यौगिक बनाता है। कास्टिक पोटाश डालने से पहले अल्फा-नेफ्थोल डालकर परीक्षण की संवेदनशीलता बढ़ाएं।
टेस्ट सेटिंग
Voges-Proskauer प्रतिक्रिया के निर्माण में सूक्ष्मजीवों की प्रारंभिक खेती शामिल है। क्लार्क के विभेदक निदान माध्यम पर एक शुद्ध संस्कृति बोई जाती है, जिसमें से एक भिन्नता क्लार्क का शोरबा है (अगर-अगर को शामिल किए बिना)। या तो तैयार माध्यम का उपयोग किया जाता है, या स्वतंत्र रूप से तैयार किया जाता है। सामग्री में शामिल हैं:
- 5g पेप्टोन;
- 5g ग्लूकोज;
- 5g डिबासिक पोटेशियम फॉस्फेट;
- 1एल डिस्टिलेट।
अध्ययन के दौरान, संस्कृति को एक तरल माध्यम में एक बाँझ बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ टीका लगाया जाता है। मात्रा - एक परखनली में 5 मिली प्लस नियंत्रण। ऊष्मायन दो दिनों के लिए 35-37 डिग्री के तापमान पर किया जाता है। इसके बाद, वोग्स-प्रोस्कुअर प्रतिक्रिया का एक अध्ययन चरणों में किया जाता है:
- 2, 5 मिली ब्रोथ कल्चर को एक बाँझ ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है।
- अल्फा-नेफ्थोल (5% अल्कोहल घोल) की छह बूंदें डालें।
- 40% जोड़ें0.1 मिली या दो बूंदों की मात्रा में कास्टिक पोटेशियम का घोल।
- परखनली को धीरे से हिलाकर हिलाया जाता है।
- प्रयोग शुरू होने के 15 मिनट बाद परिणाम का मूल्यांकन करें।
एक वैकल्पिक परीक्षण विधि रातोंरात ऊष्मायन है, जिसका समय घटाकर 18 घंटे या एक दिन तक कर दिया जाता है। इस पद्धति के अलावा, एक एक्सप्रेस परीक्षण का भी उपयोग किया जाता है: एक संस्कृति को लूप में माध्यम के 2 मिलीलीटर में पेश किया जाता है, लगभग चार घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है, फिर अभिकर्मकों को समान मात्रा में 2-3 बूंदों में मिलाया जाता है, मिश्रित और परिणाम का मूल्यांकन दस मिनट के बाद किया जाता है।
नियंत्राण निमोनिया क्लेबसिएला न्यूमोनिया - स्ट्रेन एटीसी 13883 के प्रेरक कारकों में से एक है।
परिणाम का मूल्यांकन
अभिकर्मकों (5 से 15 मिनट तक) को जोड़ने के बाद आवश्यक समय के बाद, एक चेरी-लाल रंग एक स्पष्ट सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ देखा जाना चाहिए, लाल और गुलाबी - एक कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ। कोई परिवर्तन नकारात्मक परिणाम के रूप में दर्ज नहीं किया गया है।
एक घोल में कास्टिक पोटाश की अधिकता एक सकारात्मक प्रतिक्रिया की नकल दे सकती है, तांबे के रंग में धुंधला हो जाना। इस मामले में, परीक्षण किए गए कॉलोनी की नकारात्मक प्रतिक्रिया दर्ज की जानी चाहिए। साथ ही, उन मामलों में तांबे का धुंधलापन दिखाई देता है जहां अभिकर्मकों की शुरूआत के एक घंटे बाद मूल्यांकन दिया जाता है।
परिणाम का मूल्यांकन करते समय, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि अध्ययन किए गए सूक्ष्मजीवों (तीन दिनों से अधिक) की लंबी खेती से माध्यम का अम्लीकरण होता है, जिससे अध्ययन का गलत परिणाम हो सकता है। प्रतिक्रिया हल्की सकारात्मक हो सकती है यागलत नकारात्मक।
परीक्षण अभिकर्मकों के लिए आवश्यकताएँ
Voges-Proskauer अभिकर्मकों को सही एकाग्रता, उच्च शुद्धता और स्थिरता जैसी आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए, जो उचित भंडारण के माध्यम से प्राप्त किया जाता है।
रेडी-टू-यूज़ टेस्ट किट में आमतौर पर 100 या अधिक उपयोग के लिए अभिकर्मक होते हैं और प्लास्टिक या टिंटेड ग्लास शीशियों में आते हैं। गुणवत्ता प्रासंगिक दस्तावेज़ीकरण द्वारा नियंत्रित होती है।
