"माइक्रोस्कोपी" शब्द की जड़ें ग्रीक हैं। अनुवाद में, इसका अर्थ है उच्च-सटीक उपकरणों का उपयोग करके वस्तुओं का अध्ययन। हाल ही में, प्रतिदीप्ति और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी तेजी से लोकप्रिय हो गए हैं।
संकल्प
इसके तहत, एक नियम के रूप में, वे न्यूनतम दूरी को समझते हैं जिस पर स्पष्ट रूप से अलग-अलग वस्तुएं स्थित हो सकती हैं। सूक्ष्म दुनिया में प्रवेश की डिग्री, अध्ययन के तहत तत्व के आकार पर विचार करने की क्षमता उपकरण के संकल्प पर निर्भर करेगी। उच्च आवर्धन पर, वस्तुओं की सीमाएं विलीन हो सकती हैं। तदनुसार, कुछ सीमाएँ हैं जिनसे परे तत्वों का सन्निकटन अर्थहीन है।
लुमिनेसेंस माइक्रोस्कोपी विधि: तंत्र
जब किसी पदार्थ द्वारा अवशोषित ऊर्जा को दृश्य विकिरण में परिवर्तित किया जाता है, तो एक चमक उत्पन्न होती है। इसे ल्यूमिनेसेंस कहते हैं। यह घटना इस तथ्य के कारण है कि कुछ पदार्थ, प्रकाश के प्रभाव में, एक अलग (आमतौर पर बड़ी) तरंग दैर्ध्य के साथ किरणों का उत्सर्जन करना शुरू करते हैं। इसके अलावा, कुछ वस्तुएं, जो सामान्य प्रकाश व्यवस्था के तहत, एक निश्चित होती हैंरंग, पराबैंगनी के प्रभाव में अपना रंग बदलते हैं।
विशिष्टता
एक वस्तु जिसे पराबैंगनी प्रकाश के तहत नहीं देखा जा सकता है, यदि किसी विशेष पदार्थ के साथ इलाज किया जाता है तो वह एक चमकदार चमक का उत्सर्जन कर सकता है। इसमें तत्व अंधेरे में अलग-अलग रंगों में चमकते हैं। विकिरण की ताकत अलग है, लेकिन, एक नियम के रूप में, यह छोटा है। इस संबंध में, एक अंधेरे कमरे में प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी प्रभावी है। इस प्रकार के अध्ययन का उपयोग करते समय, वस्तु को उस प्रकाश में देखा जाता है जो वह स्वयं उत्सर्जित करता है। ऊतकों, कोशिकाओं की रासायनिक संरचना अध्ययन की गुणवत्ता को प्रभावित करेगी। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी को कुछ हद तक एक हिस्टोकेमिकल अध्ययन माना जाता है।
वर्गीकरण
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी प्राथमिक या द्वितीयक हो सकता है। बाद के मामले में, वस्तु को विशेष यौगिकों के साथ संसाधित किया जाता है जो चमक देते हैं। प्राथमिक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी प्रकाश उत्सर्जित करने के लिए तत्व की अपनी क्षमता पर आधारित है।
उपकरण
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी विभिन्न उपकरणों का उपयोग करके किया जाता है। उनका मुख्य तत्व प्रकाशक है। यह यूवी लैंप से लैस है। इसके अलावा, डिवाइस फ़िल्टर के एक सेट का उपयोग करते हैं। कुछ उपकरणों में, बहुत सारे अलग-अलग कॉन्फ़िगरेशन होते हैं। ल्यूमिनेसेंस को उत्तेजित करने के लिए किस रंग का उपयोग किया जाता है - पराबैंगनी या नीला, प्रकाश स्रोत और अध्ययन के तहत वस्तु के बीच एक उपयुक्त फिल्टर रखा जाता है।चूंकि सूक्ष्म तत्व की चमक उत्तेजक प्रकाश की तुलना में ऊर्जावान रूप से कमजोर होती है, इसलिए इसे केवल एक शर्त के तहत कैप्चर किया जाएगा। स्रोत से अतिरिक्त किरणों को पीले-हरे रंग के फिल्टर द्वारा काट दिया जाना चाहिए। यह डिवाइस के ऐपिस पर स्थित होता है। ल्यूमिनेसेंस का सबसे स्पष्ट प्रभाव तब होगा जब फिल्टर प्रकाश स्रोत से निकलने वाली किरणों को पूरी तरह से काट देगा।
दृश्यमान प्रकाश संस्थापन में क्या होता है? इसमें एक उज्ज्वल प्रकाश स्रोत और एक जैविक सूक्ष्मदर्शी शामिल है। उपकरण के दर्पण और लैंप के बीच एक नीला-बैंगनी फ़िल्टर रखा गया है। यह FS-1, UFS-3 आदि हो सकता है। पीले रंग का फिल्टर माइक्रोस्कोप की ऐपिस पर लगाया जाता है। इनकी सहायता से वस्तु पर नीला-बैंगनी प्रकाश पड़ता है। यह ल्यूमिनेसेंस को उत्तेजित करता है। लेकिन यह रोशनी चमक को देखने में बाधा डाल सकती है। इसलिए, आंख के रास्ते में, इसे पीले फिल्टर से काट दिया जाता है। एक अपवाद के साथ, कोहलर विधि के अनुसार प्रकाश व्यवस्था की जाती है। कंडेनसर डायाफ्राम पूरी तरह से खुला होना चाहिए। जांच करते समय, गैर-फ्लोरोसेंट विसर्जन तेल का उपयोग करना महत्वपूर्ण है। खुद की चमक कम करने के लिए इसमें नाइट्रोबेंजीन (2-10 बूंद/1 ग्राम) मिलाया जाता है।
लुमिनेसेंस माइक्रोस्कोपी: सूक्ष्म जीव विज्ञान में अनुप्रयोग
इस प्रकार के अध्ययन के लाभ हैं:
- रंग इमेजिंग क्षमता।
- काले रंग की पृष्ठभूमि पर उच्च कंट्रास्ट स्व-उत्सर्जक तत्व।
- कुछ प्रकार के वायरस और रोगाणुओं का पता लगाना और उनका स्थानीयकरण करना।
- पारदर्शी और अपारदर्शी अध्ययन करने की क्षमताजीवित जीव।
- जीवन प्रक्रियाओं का उनके गतिकी में अध्ययन।
यह भी कहा जाना चाहिए कि ल्यूमिनसेंट माइक्रोस्कोपी हिस्टो- और साइटोकेमिस्ट्री, एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक्स के बेहतरीन तरीकों के विकास में योगदान देता है।
