बैक्टीरिया पर शोध के लिए कई उपकरणों और उपकरणों के साथ सावधानीपूर्वक काम करने की आवश्यकता है। सूक्ष्मजीवों के लिए प्रयोगशाला स्थितियों में जितनी जल्दी हो सके गुणा करने और सामान्य महत्वपूर्ण गतिविधि को बनाए रखने में सक्षम होने के लिए, विशेष पोषक माध्यम का उपयोग किया जाता है। उनकी संरचना और जैवभौतिकीय स्थितियां जीवाणु संवर्धन के सक्रिय विकास के लिए उपयुक्त हैं।
पोषक माध्यम। सूक्ष्म जीव विज्ञान और अन्य अनुप्रयोग
जैली जैसी या अर्ध-तरल सामग्री से भरे पेट्री डिश पर प्रयोगशाला में जीवाणु कॉलोनियां उगाई जाती हैं। ये पोषक माध्यम हैं, जिनकी संरचना और गुण उच्च गुणवत्ता वाली फसल वृद्धि के लिए प्राकृतिक के जितना संभव हो उतना करीब हैं।
ऐसे वातावरण का उपयोग सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान और चिकित्सा निदान प्रयोगशालाओं में किया जाता है। उत्तरार्द्ध सबसे अधिक बार रोगजनक या अवसरवादी बैक्टीरिया के स्मीयरों के साथ काम करता है, जिसकी व्यवस्थित स्थिति सीधे संस्था में निर्धारित की जाती है।
प्राकृतिक और सिंथेटिकबुधवार
बैक्टीरिया के साथ काम करने का मूल नियम पोषक माध्यम का सही चयन है। इसे सूक्ष्म और स्थूल तत्वों की सामग्री, एंजाइम, अम्लता का एक निरंतर मूल्य, आसमाटिक दबाव और यहां तक कि हवा में ऑक्सीजन का प्रतिशत सहित कई मानदंडों को पूरा करना चाहिए।
पौष्टिक मीडिया को दो बड़े समूहों में वर्गीकृत किया गया है:
- प्राकृतिक वातावरण। ऐसे मिश्रण प्राकृतिक अवयवों से तैयार किए जाते हैं। यह नदी का पानी, पौधे के हिस्से, खाद, सब्जियां, पौधे और जानवरों के ऊतक, खमीर आदि हो सकते हैं। ऐसे वातावरण में प्राकृतिक रसायनों की एक उच्च सामग्री होती है, जिनमें से विविधता जीवाणु संस्कृति के विकास को बढ़ावा देती है। इन स्पष्ट लाभों के बावजूद, प्राकृतिक वातावरण विशिष्ट जीवाणु उपभेदों के साथ विशेष अनुसंधान की अनुमति नहीं देते हैं।
- सिंथेटिक मीडिया। वे इस मायने में भिन्न हैं कि उनकी रासायनिक संरचना सभी घटकों के सटीक अनुपात में जानी जाती है। ऐसे मीडिया बैक्टीरिया की एक विशिष्ट संस्कृति के लिए तैयार किए जाते हैं, जिसके चयापचय के बारे में शोधकर्ता को पहले से ही जानकारी होती है। दरअसल, इसी वजह से सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए ऐसा सिंथेटिक वातावरण तैयार करना संभव है। उनका उपयोग बैक्टीरिया की महत्वपूर्ण गतिविधि का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है। उदाहरण के लिए, आप यह पता लगा सकते हैं कि वे पर्यावरण में कौन से पदार्थ छोड़ते हैं और कितना। प्राकृतिक मीडिया में सूक्ष्मजीव भी विकसित होंगे, लेकिन पदार्थों के प्रारंभिक अनुपात की अज्ञानता के कारण संरचना में किसी भी मात्रात्मक परिवर्तन को ट्रैक करना असंभव है।
डिफरेंशियल-नैदानिक वातावरण
बैक्टीरिया के साथ काम करने में न केवल सामान्य पोषक माध्यम का उपयोग किया जा सकता है। सूक्ष्म जीव विज्ञान एक विशाल विज्ञान है, और इसलिए, अध्ययन करते समय, कभी-कभी किसी कारण से सूक्ष्मजीवों का चयन करना आवश्यक होता है। प्रयोगशाला में डिफरेंशियल डायग्नोस्टिक मीडिया के उपयोग से पेट्री डिश पर उनकी महत्वपूर्ण गतिविधि के जैव रासायनिक संकेत के अनुसार वांछित बैक्टीरिया कालोनियों का चयन करना संभव हो जाता है।
ऐसे वातावरण की संरचना में हमेशा निम्नलिखित घटक शामिल होते हैं:
1. कोशिका वृद्धि के लिए पोषक तत्व।
2. विश्लेषण सब्सट्रेट (पदार्थ)।
3. एक संकेतक जो एक निश्चित प्रतिक्रिया होने पर एक विशिष्ट रंग देगा।
एक उदाहरण है डिफरेंशियल डायग्नोस्टिक न्यूट्रिएंट मीडियम "एंडो"। इसका उपयोग बैक्टीरिया की कॉलोनियों का चयन करने के लिए किया जाता है जो लैक्टोज को तोड़ सकते हैं। प्रारंभ में, इस माध्यम का रंग गुलाबी होता है। यदि सूक्ष्मजीवों की एक कॉलोनी लैक्टोज को तोड़ने में सक्षम नहीं है, तो यह सामान्य सफेद रंग का हो जाता है। यदि बैक्टीरिया इस सब्सट्रेट को तोड़ सकते हैं, तो वे एक विशिष्ट चमकीले लाल रंग में बदल जाते हैं।
ऐच्छिक बुधवार
डायग्नोस्टिक लैब अक्सर ऐसे स्वैब के साथ काम करते हैं जिनमें कई तरह के बैक्टीरिया होते हैं। जाहिर है, गुणवत्तापूर्ण काम के लिए दर्जनों बाहरी लोगों में से किसी तरह उन कॉलोनियों का चयन करना जरूरी है, जिनकी हमें जरूरत है। यह वह जगह है जहां एक जीवाणु वृद्धि माध्यम मदद कर सकता है, जो आदर्श रूप से केवल एक प्रकार के सूक्ष्मजीव का समर्थन करने के लिए तैयार किया गया है।
उदाहरण के लिए,ऐसा वैकल्पिक वातावरण केवल एस्चेरिचिया कोलाई के प्रजनन के लिए उपयुक्त है। फिर, पेट्री डिश पर कई बैक्टीरिया बोने से, हम केवल उसी एस्चेरिचिया कोलाई की कॉलोनियां देखेंगे और नहीं। काम शुरू करने से पहले, अध्ययन किए गए जीवाणु के चयापचय को अच्छी तरह से जानना आवश्यक है ताकि इसे अन्य प्रजातियों के मिश्रण से सफलतापूर्वक चुना जा सके।
ठोस, अर्ध-ठोस और तरल संस्कृति मीडिया
जीवाणु न केवल ठोस सब्सट्रेट पर उगाए जा सकते हैं। पोषक माध्यम अपने एकत्रीकरण की स्थिति में एक दूसरे से भिन्न होते हैं, जो निर्माण के दौरान संरचना पर निर्भर करता है। प्रारंभ में, उन सभी में एक तरल स्थिरता होती है, और जब जिलेटिन या अगर को एक निश्चित प्रतिशत में मिलाया जाता है, तो मिश्रण जम जाता है।
लिक्विड कल्चर मीडिया आमतौर पर टेस्ट ट्यूब में पाए जाते हैं। यदि ऐसी परिस्थितियों में बैक्टीरिया विकसित करना आवश्यक हो जाता है, तो संस्कृति के नमूने के साथ एक समाधान जोड़ें और 2-3 दिन प्रतीक्षा करें। परिणाम अलग-अलग हो सकते हैं: एक अवक्षेप रूप, एक फिल्म दिखाई देती है, छोटे गुच्छे तैरते हैं, या एक बादल घोल बनता है।
जीवाणु कालोनियों के गुणों का अध्ययन करने के लिए अक्सर सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान में घने संवर्धन माध्यम का उपयोग किया जाता है। ऐसे मीडिया हमेशा पारदर्शी या पारभासी होते हैं ताकि सूक्ष्मजीवों की संस्कृति के रंग और आकार को सही ढंग से निर्धारित करना संभव हो।
मीडिया की तैयारी
शोरबा, जिलेटिन या अगर पर आधारित मांस-पेप्टोन मिश्रण जैसे सबस्ट्रेट्स तैयार करना बहुत आसान है। यदि आपको एक ठोस या अर्ध-तरल सब्सट्रेट बनाने की आवश्यकता है, तो एक तरल मेंक्रमशः 2-3% या 0, 2-0, 3% जिलेटिन या अगर जोड़ें। वे मिश्रण को सख्त बनाने में एक प्रमुख भूमिका निभाते हैं, लेकिन वे पोषक तत्वों का स्रोत नहीं हैं। इस प्रकार, पोषक माध्यम प्राप्त होते हैं जो जीवाणु संवर्धन के विकास के लिए उपयुक्त होते हैं।
