सूक्ष्म जीव विज्ञान में रेडियोइम्यून परख: अनुप्रयोग, तंत्र

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सूक्ष्म जीव विज्ञान में रेडियोइम्यून परख: अनुप्रयोग, तंत्र
सूक्ष्म जीव विज्ञान में रेडियोइम्यून परख: अनुप्रयोग, तंत्र
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आधुनिक चिकित्सा में विशिष्ट निदान विधियां हैं जो रोगज़नक़ की परिभाषा के आधार पर मनुष्यों में रोगों के एटियलजि को स्थापित करना संभव बनाती हैं, आनुवंशिक रूप से विदेशी पदार्थ जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, न्यूक्लिक एसिड, साथ ही एलर्जी और प्रतिरक्षा परिवर्तनों को उत्तेजित करते हैं। जो उसके कार्यों के कारण होता है। आज, आरआईए का व्यापक रूप से इम्यूनोलॉजी और वायरोलॉजी में उपयोग किया जाता है, अर्थात्, रेडियोइम्यूनोसे, सेटिंग के लक्ष्य, घटक, पाठ्यक्रम, जिसका लेखांकन, हम इस लेख में विचार करेंगे। यह परख एंटीबॉडी के साथ उनकी बातचीत के परिणामस्वरूप एंटीजन का पता लगाने में सक्षम है।

रेडियोइम्यूनोएसे
रेडियोइम्यूनोएसे

परिभाषा

RIA तरल पदार्थों में जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों के निदान के लिए एक विधि है, जो विशेष बाइंडिंग सिस्टम वाले रेडियोन्यूक्लाइड-लेबल वाले अनुरूप पदार्थों का उपयोग करते समय एंटीबॉडी के साथ एंटीजन की प्रतिक्रिया पर आधारित है। उनकी बातचीत के बादएक प्रतिरक्षा परिसर बनता है, जिसे अलग किया जाता है और इसकी रेडियोधर्मिता का अध्ययन किया जाता है। यह ज्ञात है कि मानक अभिकर्मक किट का उपयोग करके रेडियोइम्यूनोसे किया जाता है।

प्रत्येक अभिकर्मक एक विशिष्ट पदार्थ की सांद्रता निर्धारित करने में सक्षम है। किसी व्यक्ति से लिए गए जैविक द्रव को अभिकर्मक के साथ मिलाया जाता है, ऊष्मायन अवधि के बाद, मुक्त और बाध्य रेडियोधर्मी पदार्थ अलग हो जाते हैं, फिर रेडियोमेट्री की जाती है और परिणामों की गणना की जाती है। आयोडीन के एक समस्थानिक का उपयोग पदार्थों को लेबल करने के लिए किया जाता है। इसे एक निश्चित मात्रा में चिह्नित और जोड़ा जाता है।

रेडियोइम्यूनोसे माइक्रोबायोलॉजी
रेडियोइम्यूनोसे माइक्रोबायोलॉजी

आवेदन

रेडियोइम्यून विश्लेषण का चिकित्सा और सूक्ष्म जीव विज्ञान में व्यापक अनुप्रयोग है। इसका उपयोग हृदय और संवहनी रोगों, अंतःस्रावी रोगों और शरीर की अन्य प्रणालियों के निदान के लिए किया जाता है। आरआईए का उपयोग अक्सर बांझपन के कारण की पहचान करने के लिए किया जाता है, भ्रूण के विकास की विकृति। ऑन्कोलॉजी में, उपचार की प्रभावशीलता की निगरानी करने में सक्षम होने के लिए नियोप्लाज्म के मार्करों को निर्धारित करने के लिए यह विश्लेषण किया जाता है। इम्यूनोलॉजी में, आरआईए का उपयोग रक्त में इम्युनोग्लोबुलिन, एंजाइम, प्रोटीन आदि की उपस्थिति का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। आज, यह विश्लेषण आपको एक ग्राम के दस लाखवें हिस्से तक विभिन्न हार्मोन की एकाग्रता का पता लगाने की अनुमति देता है। इस प्रकार, कार्डियोलॉजी, ऑन्कोलॉजी, एंडोक्रिनोलॉजी, स्त्री रोग और वायरोलॉजी में रेडियोइम्यून रक्त विश्लेषण का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

रेडियोइम्यूनोसे आवेदन
रेडियोइम्यूनोसे आवेदन

आरआईए तरीके

प्रकृति के आधार पर विश्लेषण के कई तरीकों के बीच अंतर करने की प्रथा हैप्रतिक्रियाएं:

  1. गैर-प्रतिस्पर्धी विधि को मानक और पता लगाने योग्य एंटीजन, बफर समाधान, आइसोटोप-लेबल एंटीबॉडी, कुछ एंटीबॉडी जैसे प्रतिक्रिया घटकों द्वारा विशेषता है जो सॉर्बेंट को बांधते हैं। परीक्षण के लिए एंटीबॉडी में एक एंटीजन जोड़ा जाता है। ऊष्मायन के बाद, एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स दिखाई देते हैं, सॉर्बेंट को धोया जाता है, लेबल वाले एंटीबॉडी जोड़े जाते हैं, जो कॉम्प्लेक्स में एंटीजन को बांधते हैं। रेडियोधर्मिता परीक्षण किए जा रहे प्रतिजन की सांद्रता पर निर्भर करती है।
  2. प्रतिस्पर्धी रेडियोइम्यूनोसे एंटीजन प्रतियोगिता से प्रेरित है। यहां प्रतिक्रिया के ऐसे घटक होते हैं जैसे नियंत्रण और निर्धारित एंटीजन, एक बफर समाधान, कुछ एंटीबॉडी जो सॉर्बेंट से बंधे होते हैं, साथ ही एक आइसोटोप-लेबल एंटीजन भी होते हैं। निदान उस एंटीजन की शुरूआत के साथ शुरू होता है जिसकी जांच की जा रही है। सॉर्बेंट पर एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनता है। फिर सॉर्बेंट को धोया जाता है, और लेबल किए गए एंटीजन को इंजेक्ट किया जाता है। ऐसा करने में, यह एंटीबॉडी को बांधता है। काउंटरों की मदद से प्रतिक्रिया और रेडियोधर्मिता की मात्रा को मापा जाता है। यह नमूने में प्रतिजन की मात्रा के व्युत्क्रमानुपाती होगा।
  3. अप्रत्यक्ष तरीका सबसे आम है। इस मामले में, प्रतिक्रिया घटक के रेडियोइम्यूनोसे में नियंत्रण और परीक्षण सीरम, एंटीजन या एंटीबॉडी होते हैं जो सॉर्बेंट पर बंधे होते हैं, आइसोटोप के साथ लेबल किए गए एंटीबॉडी, बफर समाधान। एंटीबॉडी या एंटीजन जिनका निदान किया जाता है, एंटीजन या एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया करते हैं जो सॉर्बेंट से बंधे होते हैं। फिर इनक्यूबेट को हटा दिया जाता है, लेबल किए गए एंटीबॉडी इंजेक्ट किए जाते हैं, जो से बंधते हैंएंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स।

विश्लेषण पद्धति

तो, विशेष अभिकर्मकों का उपयोग करके रेडियोइम्यूनोसे किया जाता है। सेट मानक हैं, इसलिए किसी भी त्रुटि या उल्लंघन की अनुमति नहीं है। नैदानिक परिणाम विश्वसनीय हैं। विश्लेषण सुबह किया जाता है, इसके लिए वे एक व्यक्ति से शिरापरक रक्त लेते हैं। प्रयोगशाला में, सीरम को रक्त से अलग किया जाता है, जिसका उपयोग आरआईए के लिए किया जाएगा। यह सीरम अभिकर्मकों के साथ मिलाया जाता है। परिणामी मिश्रण थर्मोस्टैट में दिए गए तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है।

मुक्त और बाध्य समस्थानिक परिणामी मिश्रण में अलग हो जाते हैं। उसके बाद, प्राप्त सामग्री की जांच की जाती है, और परिणामों की गणना की जाती है। Radioimmunoassay तंत्र में कई विकल्प हैं। ऊपर वर्णित तकनीक एक तरल-चरण आरआईए है, क्योंकि सभी घटक तरल अवस्था में हैं। आरआईए और ठोस-चरण है, जहां एंटीबॉडी को एक वाहक में रखा जाता है जो तरल में नहीं घुलता है।

रेडियोइम्यून रक्त परीक्षण
रेडियोइम्यून रक्त परीक्षण

निदान की उपलब्धता

चिकित्सा में इस निदान पद्धति का उपयोग हर साल अधिक से अधिक लोकप्रिय होता जा रहा है। हाल ही में, रेडियोइम्यूनोसे एक मानक निदान पद्धति बन गई है जिसे अंतिम निदान करते समय डॉक्टर द्वारा निर्धारित किया जा सकता है। लंबे समय तक इस प्रकार का विश्लेषण केवल प्रयोगशालाओं में किया जाता था, आज यह एक सामान्य शोध पद्धति बन गई है। लेकिन आरआईए को महंगे उपकरण (गामा काउंटर) के उपयोग की आवश्यकता होती है, और अभिकर्मक किट की सेवा जीवन कम होता है। यह सब इस तरह के विश्लेषण का मुख्य दोष है, जो इसे निर्धारित करता हैमहंगा खर्च।

इसके अलावा, आरआईए ने हाल ही में अधिक आधुनिक अनुसंधान विधियों को प्रतिस्थापित करना शुरू कर दिया है जिन्हें आइसोटोप के साथ बातचीत की आवश्यकता नहीं है। इनमें एंजाइम इम्युनोसे शामिल हैं। इस प्रकार, कई क्लीनिकों में आरआईए वांछनीय है। यह लंबे समय से बड़े शहरों और नैदानिक केंद्रों में उपयोग किया जाता है, लेकिन छोटे शहरों के सामान्य अस्पतालों में इसकी उच्च लागत के कारण इस विश्लेषण का व्यावहारिक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है।

रेडियोइम्यूनोएसे घटक
रेडियोइम्यूनोएसे घटक

रिया की मर्यादा

Radioimmunoassay के कई फायदे हैं। यह काफी विशिष्ट है और इसमें उच्च संवेदनशीलता है, जो अविश्वसनीय रूप से कम मात्रा में जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की उपस्थिति का निर्धारण करना संभव बनाता है। यह विश्लेषण बहुत ही सरलता से किया जाता है, एक व्यक्ति को केवल शिरापरक रक्त दान करने की आवश्यकता होती है। परीक्षण के परिणाम 100% सटीक होते हैं और अगले ही दिन तैयार हो जाते हैं। आरआईए को भी आसानी से स्वचालित किया जा सकता है। इस प्रकार, यह विश्लेषण आपको प्रोटीन की पहचान करने की अनुमति देता है जो संक्रामक बैक्टीरिया के अपशिष्ट उत्पाद हैं, जो शरीर में संक्रमण की उपस्थिति को इंगित करता है।

घटकों की प्रगति लेखांकन निर्धारित करने के लक्ष्य का रेडियोइम्यून विश्लेषण
घटकों की प्रगति लेखांकन निर्धारित करने के लक्ष्य का रेडियोइम्यून विश्लेषण

वायरोलॉजी में निदान

सबसे आशाजनक आरआईए वायरोलॉजी के लिए है, क्योंकि यह आपको वायरल रोगजनकों को जल्दी से पहचानने की अनुमति देता है। यह इस तथ्य के कारण है कि हाल के वर्षों में विभिन्न संक्रमणों की घटनाएं बढ़ रही हैं, जो तेज गति से फैल रही हैं, जिससे लोगों में मृत्यु दर बढ़ रही है। यह उन देशों के लिए विशेष रूप से सच है जिनके पास उच्च नहीं हैसामाजिक और आर्थिक विकास (सुदूर पूर्व के देश), रेडियोइम्यूनोसे यहाँ अपरिहार्य है। सूक्ष्म जीव विज्ञान भी इस निदान पद्धति का उपयोग रोगजनक बैक्टीरिया के कारण होने वाले संक्रामक रोगों का पता लगाने के लिए करता है। उदाहरण के लिए, टाइफाइड बुखार का पता लगाने के लिए आरआईए का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। रोग के पहले दिनों में, उपचार की नियुक्ति से पहले, मल और उल्टी का अध्ययन करना आवश्यक है। हालांकि, नैदानिक परिणाम लंबे समय के बाद प्राप्त किए जाएंगे। यहां आरआईए बचाव के लिए आता है, विश्लेषण आपको थोड़े समय में रोग के प्रेरक एजेंट की पहचान करने की अनुमति देता है। एक व्यक्ति रक्तदान करता है, अगले दिन अध्ययन के परिणाम तैयार होते हैं। यह विश्लेषण सटीक निदान करने में मदद करता है।

परिणाम

Radioimmunoassay वर्तमान में सबसे संवेदनशील निदान विधियों में से एक है। इसका उपयोग किसी भी पदार्थ का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है जिसके खिलाफ एंटीबॉडी प्राप्त की जा सकती हैं। यह विधि जांच किए गए तरल की सबसे छोटी मात्रा में कई नमूने बनाना संभव बनाती है, साथ ही कम से कम समय में परिणाम रिकॉर्ड करना संभव बनाती है, क्योंकि यह पूरी तरह से स्वचालित हो सकता है। यह विश्लेषण 1950 के दशक में सोलोमन बर्सन द्वारा विकसित किया गया था। तीस साल बाद, यह व्यापक हो गया। आज तक, आरआईए का कोई सौ प्रतिशत विकल्प नहीं है, क्योंकि विश्लेषण में उच्च संवेदनशीलता है। आरआईए का उपयोग चिकित्सा की विभिन्न शाखाओं के साथ-साथ सूक्ष्म जीव विज्ञान और विषाणु विज्ञान में भी किया जाता है।

रेडियोइम्यूनोएसे तंत्र
रेडियोइम्यूनोएसे तंत्र

आखिरकार

विषाणु विज्ञान में पद्धति का उपयोग आज बहुत प्रासंगिक है, क्योंकि यह देता हैसंक्रमण के प्रसार की जांच करने, सटीक निदान करने और विशिष्ट उपचार निर्धारित करने की क्षमता। यह समस्या उन देशों के लिए विशेष रूप से प्रासंगिक है जिनके पास निम्न स्तर की अर्थव्यवस्था और सामाजिक विकास है। साथ ही, यह विश्लेषण आपको मानव शरीर में हार्मोन और एंजाइम की मात्रा का पता लगाने की अनुमति देता है। विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, शोधकर्ता को केवल विश्लेषण के लिए रक्त दान करने की आवश्यकता होती है। दवा स्थिर नहीं रहती है, रेडियोइम्यूनोसे के साथ-साथ, नई शोध विधियां सामने आती हैं, लेकिन आरआईए चिकित्सा निदान में अग्रणी है।

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